Энцефаломиелит свиней
[Encephalomielitis of pigs]
Энцефаломиелит свиней (ЭС), рвотная болезнь поросят, коронаинфекция - контагиозная болезнь поросят раннего возраста, проявляющаяся симптомами рвоты, потерей аппетита, истощением и гибелью на первой неделе жизни.
ЭС выделен в Польше в 1971 г. от больных новорожденных поросят, а также изолирован из носовых раковин свиней с симптомами атрофического ринита в 1972 г. в США. В 1962 г. в Канаде Григ и соавторы выделили вирус, патогенный для свиней. Он был назван ГА вирусом энцефаломиелита свиней и позднее отнесен к семейству коронавирусов. В 1964 г. подобный вирус был выделен в Великобритании от поросят-сосунов и отьемышей с признаком анорексии, угнетения, но без признаков энцефаломиелита (болезнь рвоты и истощения). Экспериментально воспроизвести эти формы заболевания удалось в 1976 г.
Клинические признаки и патологоанатомические изменения. При заражении ГА вирусом энцефаломиелита свиней (ГВЭС) возможны два клинических проявления болезни: острое течение с явлениями энцефаломиелита и синдромом рвоты и истощения. Оба синдрома встречаются у поросят менее 3-недельного возраста, хотя свиньи старшего возраста также могут заболевать с кратковременной потерей аппетита и массы. У больных поросят отмечают депрессию, частую рвоту, потерю аппетита, гиперстезию, расстройство координации, истощение. В помете заболевает от 20 до 100% поросят с максимальной смертностью на первой неделе жизни.
В начале вспышки синдрома рвотной болезни наблюдается кашель и истечения из носа. Инкубационный период обычно составляет 4-7 дней. Поросята 4-недельного возраста начинают сосать, но быстро прекращают, отходят от свиньи, у них наблюдается рвота от только что полученного молока. Они скучиваются, выглядят бледными и безразличными, часто выгибают спины. Температура тела может подниматься в начале заболевания, но возвращается к норме через 1-2 дня. Зараженные свиньи часто скрежещут зубами, погружают рот в воду, но пьют мало, у некоторых из них возможен паралич глотки. Рвота и снижающийся объем потребляемого корма приводит к запорам и быстрому снижению упитанности. У наиболее молодых поросят наблюдается обезвоживание в течение нескольких дней, проявляются диспния и цианоз, кома и смерть. Более старшие поросята теряют аппетит и быстро истощаются. У них продолжается рвота, хотя менее часто, чем в начале заболевания. У некоторых животных наблюдается растяжение краниальной части живота. Эта стадия исхудания может длиться несколько недель вплоть до гибели поросят. Смертность среди таких животных достигает 100 %.
Вспышка с явлениями энцефаломиелита может начинаться так же, как и синдром рвоты и исхудания. У некоторых поросят отмечается рвота через 4-7 дней после рождения. Рвота может продолжаться 1-2 дня и не приводит к обезвоживанию. В других случаях первым признаком является острое угнетение и тенденция к скучиванию. Истощение может наступать через 2 дня после рождения. Иногда наблюдается кашель, чихание или поражение органов верхних отделов респираторного тракта. Поросята быстро теряют массу и волосяной покров. Через 1-3 дня появляются тяжелые симптомы энцефаломиелита.
Молодые поросята поражаются более тяжело, у них проявляются различные комбинации нервных признаков: общий мышечный тремор, поза сидячей собаки, лежание на спине. Поросята быстро становятся очень слабыми и не способными вставать, шлепают губами. Слизистые оболочки рта и носа цианотичны. Наблюдаются эписто-тонус, нистагмы и слепота. В большинстве случаев кома предшествует смерти. Смертность обычно 100 %. У старших поросят может быть легкое, проходящее заболевание, при котором последующий паралич - основной признак. Парезы в некоторых случаях сопровождаются слепотой. Животные могут выздоравливать через 3-5 дней.
Патогенез. Некоторые наблюдения показали, что ГВЭС способен реплицироваться в верхнем отделе респираторного тракта без проявления клинических признаков. Выделяли вирус из носовых истечений здоровых свиней. Главный путь выделения вируса - носовые секреты. При экспериментальном ороназальном заражении новорожденных, лишенных молозива поросят штаммом, вызывающим рвотный синдром, инкубационный период составлял 4 дня, после чего отмечалась рвота и отсутствие аппетита. В эпителиальных клетках слизистой оболочки носа, гландах, легких, тонком кишечнике обнаруживались очаги первичной репродукции вируса. После первичной репликации в месте проникновения вирус распространяется по периферической нервной системе в ЦНС. При этом задействованы, по крайней мере, три пути. Первый путь ведет из слизистой оболочки носа и гланд в тригеминальные ганглии и тригеминальные сенсорные ядра в головном мозге. Второй путь - вдоль n. vagus в сенсорные центры головного мозга. Третий путь ведет от интерстинального сплетения к спинному мозгу, также после репликации в местных сенсорных ганглиях. Виремия не имеет существенного значения в патогенезе заболевания.
В ЦНС инфекция начинается в хорошо различимых ядрах среднего мозга и позднее прогрессирует в головной и спинной мозг.
Рвота может обусловливаться репликацией вируса в сенсорных центрах n. vagus или импульсами в рвотный центр, обусловленными инфицированными нейронами различных зон. Для изучения патогенеза истощения проведены исследования хронически инфицированных, вагоэктомированных и контрольных животных, которые показали, что расстройство желудка пустотой играет важную роль в патогенезе исхудания и рвотной болезни.
Гистологические изменения в ЦНС характеризуются негнойным энцефаломиелитом с периваскулярной инфильтрацией мононуклеарных клеток, глиозом. гибелью нейронов. Микроскопические поражения отмечаются в заглоточных лимфоузлах, нервной системе, органах дыхательной системы и желудка в острый период заболевания. Тонзиллярные изменения характеризуются дегенерацией эпителиальных клеток и инфильтрацией крипт лимфоцитами. Негнойный энцефаломиелит наблюдается у 70-100 % свиней с нервными признаками болезни, у 20-60 % поросят с синдромом рвоты-исхудания. Поражения характеризуются периваскулярными манжетами, глиозисом и дегенерацией нейронов. Энцефалитические поражения являются специфическим иммунным ответом на реплицирующийся ГВЭС в ЦНС. Микроскопические изменения в желудочной стенке и легких обнаруживаются только у поросят с синдромом рвотной болезни. Дегенерация ганглий стенки желудка и периваскулярные муфты встречаются у 15-85 % больных животных. Поражения наиболее выражены в ганглиях пилорной части. У 20 % наблюдается интестинальная перибронхиальная пневмония с инфильтрацией альвеол нейтрофилами и макрофагами.
Эпизоотологические исследования показывают преобладание инфицирования свиней ГВЭС, однако естественное распространение болезни невелико. Поросята обычно защищены пассивными колостральными AT, а затем развивается соответствующая возрастная устойчивость к потенциальному заражению с развитием клинических признаков заболевания.
Морфология и химический состав. Морфология ГВЭС аналогична другим корона-вирусам. Вирусные частицы сферические, диаметр их 120 нм, содержат две концентрические мембраны, включенные в центральное ядро, и 5 полипептидов, 4 из которых гликозилированы, мол. м. от 31 до 180 кД, Плавучая плотность в CsCb составляет 1,21 г/смЗ.
Вирус устойчив при рН 4-10 и очень чувствителен к нагреванию: полностью утрачивает инфекционность при 56 град.С в течение 30 мин, при 4 град.С в течение 7 дней инфек-ционность снижается только на 0,8 lg. Чувствителен к жирорастворителям, включая дезоксихолат натрия. Жирорастворители могут применяться для дезинфекции. Ультрафиолетовое облучение также инактивируют вирус.
У экспериментально зараженных поросят (через рот или интраназально) через 6-9 дней выявляют AT (анти-ГА и ВНА). Анти-ГА в сыворотках поросят проявляются через 6 дн после заражения, а ВНА - через 9 дней.
Антигенная вариабельность и родство. Вирус представлен двумя идентичными шт. 67N и VW-572, которые не родственны вирусу ТГС и возбудителю болезни Тешена. Вирус, выделенный в 1971 г. в Польше от больных поросят, в антигенном отношении также отличался от вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Он проходит через фильтр с порами в 50 нм, агглютинирует эритроциты кур. При 56 град. С инактивируется в течение 5 мин, при 20 град.С - за 4 дня, при 4 град.С сохраняется 4 недели, при - 40 град.С - в течение 12 месяцев. Культивируется в гомологичной культуре клеток; в естественных условиях поражает поросят до 2-недельного возраста. Не известно, аналогичен ли по своему таксономическому положению вирус, изолированный в Польше, ГА вирусу энцефаломиелита свиней, выделенному в США. В настоящее время описан только один серотип вируса, несмотря на наличие, по крайней мере, двух клинических форм заболевания. Чувствительность поросят и вирулентность штамма обусловливают то или иное клиническое проявление болезни. АГ взаимосвязь между ГВЭС и вирусом неонатальной диареи телят установлена в РН и РТГА, ИФ и ИЭМ, а также с человеческим респираторным коронавирусом ОС43 и вирусом гепатита мышей. Умеренная перекрестная РН наблюдалось между ГВЭС и коронавирусом энтерита индеек. ГА активность вируса выявлена с эритроцитами кур, крыс, кошек и морских свинок. Наибольшие титры были отмечены с эритроцитами морской свинки. Вирус не агглютинирует эритроциты свиньи, хомяка, овцы и КРС. ГА-свойства вируса более устойчивы к воздействию физико-химических факторов, чем инфекционные. Кроме ГА-свойств, вирус HEV обладает ГА-свойствами с эритроцитами кур, мышей и крыс. Элюция ГВЭС с эритроцитов не наблюдается. ГА-свойства с эритроцитами животных указанных видов используются для индикации репродукции вируса в инокулирован-ных культурах клеток.
У зараженных поросят, не получающих молозива после инкубационного периода, продолжающегося 4-6 дней, развивается рвотная болезнь. 5-дневные сосунки погибают через 3-4 дня после заражения.
Культивирование. Вирус размножается в культуре клеток почки поросенка, образуя гигантские клетки. Шт. VW-572, активно размножаясь, вызывает ЦПИ. На первичных культурах клеток почки поросят индуцирует цитопатические изменения, проявляющиеся образованием синцитиев. Добавление нецитотоксических количеств ди-этиламиноэтилдекстрана может усиливать ЦПЭ. Обнаружить репродукцию ГВЭС с использованием ИФ удавалось в культурах клеток щитовидной железы свиней, легких эмбрионов свиней, перевиваемой линии тестикулярных клеток свиней, линиях клеток РК-15, IBRS2, SK-K. Клетки не свиного происхождения малочувствительны к ГВЭС. Вирусные частицы могут выявляться электронным микроскопом в цитопа-тических везикулах инфицированных клеток. Скопление вирусных частиц наблюдается у мембран эндоплазматического ретикулума.
Первые признаки репликации были обнаружены через 7>/2 ч после заражения. Вирус локализуется преимущественно в ядре. При окраске культур через 24 ч после заражения обнаруживают множество пикнотических ядер. В зараженных культурах отмечена задержка митоза. В некоторых клетках были видны ядерные включения. Часто отмечалось уплотнение цитоплазмы и появление округленных клеток, а к 120-му часу после заражения клетки отделялись от стекла в питательную среду.
Поросята - единственный известный вид животных, чувствительных к ГВЭС. Инфицированность свиней достаточно высока и почти повсеместна. На откормочных фермах Канады 31 % проб сыворотки крови оказались положительными, в Северной Ирландии - 46, в Великобритании - 49, в Японии - 52, в Германии - 75 и в США - 0-89 % в зависимости от зоны обследования. Процент серопозитив-ных свиноматок в период подсоса варьировал от 43 % до 98 %. Высокий процент се-ропозитивных животных установлен в Дании, Франции, Австралии, Бельгии, Австрии. В стадах, где ЭС является энзоотическим заболеванием, большинство поросят имеют протективные колостральные AT, которые персистируют 4-18 (в среднем 10,5) недель. Со временем уровень их снижается, поросята приобретают возрастную устойчивость. Естественным хозяином являются свиньи. В экспериментальных условиях вирус может адаптироваться к мышатам. Чувствительность их зависит от возраста и пути инокуляции.
Иммунитет и специфическая профилактика. Обычно в энзоотически неблагополучных хозяйствах циркулирующий вирус обеспечивает у подсосных свиноматок достаточно высокий титр колостральных AT, которые защищают поросят от клинического проявления зоболевания. При полной серонегативности свиноматок и в случае заноса ГВЭС в течение первых 3 недель после рождения могут возникать клинически выраженные заболевания. Профилактировать ЭС в таком случае можно введением поросятам в момент рождения специфической гипериммунной сыворотки.
