Испытуемая моча должна быть предварительно подкислена несколькими каплями серной кислоты. В присутствии уробилина получается полоса поглощения на границе зеленого цвета с синим. Спектроскопия сильно пигментированной мочи за счет желчных пигментов невозможна.