Лабораторное занятие № 5 Общая эмбриология: прогенез, оплодотворение, дробление
Микропрепараты:
1. Олиголецитальная яйцеклетка собаки и мезолецитальная яйцеклетка беззубки в срезах яичников. Г.-э.
При малом увеличении изучить видовые особенности строения яйцеклеток собаки и беззубки. Обратить внимание на разницу в их размерах, количестве желточных включений, в расположении ядер. В яичнике собаки найти яйцеклетку (овоцит I порядка) во вторичном фолликуле. Рассмотреть структуры фолликула при большом увеличении. Убедиться в том, что созревающая яйцеклетка окружена вторичной прозрачной оболочкой (zona pellucida), окрашивающейся эозином в красный цвет, и сформированным лучистым венцом (corona radiata). Цитоплазма бледная, так как содержит небольшое количество желточных включений. Почти в центре овоцита находится круглое слабо окрашенное ядро, в котором хорошо контурируется ядрышко.
Размеры яйцеклеток беззубки существенно большие. Они ограничены только одной плазмолеммой, в цитоплазме много базофильных гранул желтка, ядра круглые, располагаются эксцентрично в вегетативных полюсах клеток.
Зарисовать при большом увеличении микроскопа по одной яйцеклетке с характерными для них морфологическими особенностями.
2. Спермии петуха, морской свинки, быка В мазках (железн. гем-н) и Крысы В срезе семенника (г.-э.).
При малом увеличении микроскопа найти мужские половые клетки, а затем при большом увеличении внимательно изучите видовые особенности их строения, обратив при этом внимание на размеры и форму головки с акросомой, связующего отдела и хвостика, после чего Обозначьте Их видовую принадлежность и структурные образования на представленном рисунке.
3. Асинхронное дробление зародышей млекопитающих (морская свинка, золотистый хомячок) в просвете яйцеводов. Г.-э.
При малом увеличении между складками слизистой оболочки яйцевода найти зародыш на стадии дробления. При большом увеличении на одном из его полюсов непосредственно под блестящей зоной видно небольших размеров редукционное тельце. Бластомеры окрашены слабо базофильно, в некоторых из них видны попавшие в срез ядра. Изучив микропрепарат, сделайте обозначения на представленном рисунке.
4. Демонстрационные препараты. Полное неравномерное дробление зародыша лягушки. Пикриновая кислота и гем-н. Изучить Без зарисовки. Найти: 1 – бластодерма; 2 - микробластомеры; 3 - макробластомеры; 4 - бластоцель.
5. Демонстрация. Строение мезолецитальной яйцеклетки беззубки. Железн. гем-н; г-э. Изучить Без зарисовки. Найти: 1 - ядро с ядрышком; 2 – желточные включения; 3 - анимальный полюс; 4 - вегетативный полюс.
6. Демонстрация. Строение телолецитальной яйцеклетки лягушки. Г.-э. Изучить Без зарисовки. Найти: 1 – оболочка; 2 - ядро; 3 – цитоплазма; 4 – желточные включения.
7. Демонстрация. Этапы оплодотворения (пенетрация, сближение пронуклеусов, образование синкариона) и особенности дробления зародышей аскариды (изучить без зарисовки):
· оплодотворение яйцеклетки аскариды. Гем-н. Найти: в ооплазме - пронуклеусы яйцеклетки и спермия, а также жгутик;
· синкарион аскариды. Железн. гем-н. Найти отцовские и материнские хромосомы в ооплазме;
· полное равномерное дробление зародышей аскариды. Железн. гем-н; г.-э. Найти зародышей на стадии 2-х, 4-х и 8-ми бластомеров.
Задание для самостоятельной внеаудиторной работы (начало)
Схема ультрамикроскопического строения яйцеклетки млекопитающего |
Схема ультрамикроскопического строения спермия млекопитающего |
Последовательные этапы оплодотворения (схема по Ю. И.Афанасьеву с соавт., 1999) |
Обозначить: ____ – ядро овоцита; ____ – Zona pellucida; ____ – эндоплазматический ретикулум; ____ – митохондрии; ____ – желточные включения; ____ – микроворсинки овоцита; ____ - рецепторы; ____ – лучистый венец; ___ – отростки фолликулярных клеток; ____ - кортикальные грарулы. |
Обозначить: 1 – головка; 2 – шейка; 3 – тело; 4 – хвост; 5 – ядро; 6 – акросома; 7 – осевая нить; 8 – проксимальная центриоль; 9 – дистальная центриоль; 10 – митохондрия; 11 - микротрубочки. |
Обозначить: ___ - ядро яйцеклетки; ___ - ооплазма; ___ - кортикальные гранулы; ___ - блестящая зона; ___ - спермий; ___ - редукционные тельца; ___ - лучистый венец; ___ - место пенетрации; ___ - женский пронуклеус; ___ - мужской пронуклеус; ___ - синкарион; ___ - оболочка оплодотворения. |
ЗАдание для самостоятельной внеаудиторной работы (продолжение)
Типы дробления |
Типы бластул |
Последовательные этапы дробления зародыша высших млекопитающих (схема по Н. П.Барсукову) |
Обозначить: 1 – полное равномерное дробление; 2 - полное неравномерное дробление; 3 – полное асинхронное дробление; 4 – частичное (дискоидальное) дробление. |
Обозначить: 1 – целобластула; 2 – бластоциста; 3 – амфибластула; 4 – дискобластула; 5 – бластомеры; 6 – бластодерма; 7 – дно; 8 – крыша; 9 – краевая зона; 10 – бластоцель; 11 – желток; 12 – микробластомеры; 13 - макробластомеры. |
Обозначить: 1 – блестящая зона; 2 – бластомеры; 3 - ядро бластомера; 4 – редукционные тельца; 5 – микробластомеры; 6 – макробластомеры; 7 - трофобласт; 8 – эмбриобласт (внутренняя клеточная масса). |
Микропрепараты к заданию 1. Яйцеклетка собаки (А) и беззубки (Б) |
Микропрепарат 2. Строение спермиев. Железный гематоксилин |
Микропрепарат 3. Зародыш млекопитающего на стадии дробления. Г.-э. |
А Обозначить: 1 - ядро с ядрышком; 2 – желточные включения в цитоплазме; 3 - zona pellucida; 4 - corona radiata. |
I II III IV Обозначить Видовую принадлежность и структуры спермиев: I - …………………………………………….; II - ……………………………………………; III - ………………………………………….. ; IV - …………………………………………… 1 - головка с ядром; 2 - жгутик; 3 – акросома; 4 – связующий отдел (шейка). |
Обозначить: 1 - zona pellucida (красный цвет); 2 – микробластомеры; 3 – макробластомеры; 4 - редукционные (направительные, или полярные) тельца. Окрасить: zona pellucida – в красный цвет; Цитоплазму бластомеров и полярных телец – в голубой цвет; ядра – в синий цвет. |
Б Обозначить: 1 - ядро с ядрышком; 2 – желточные включения в цитоплазме; 3 – плазмолемма. |