ВИГОТОВЛЕННЯ НЕРВОВО-М'ЯЗОВОГО ПРЕПАРАТУ
Фізіологію м'язів вивчають на ізольованому нервово-м'язовому препараті, який складається з сідничного нерва та литкового м'яза жаби. Жабу загортають в марлю або ганчірку так, щоб вільною залишилася тільки голова. Один кінець великих гострокінцевих ножиць вводять в ротову порожнину і одним рухом відрізають жабі голову позаду очей. Тонким зондом або рівною дротиною руйнують спинний мозок. Добре промивають водою жабу і руки. Задні лапки жаби загортають. у рушник і, тримаючи їх лівою рукою, опускають жабу головою униз.
Правою рукою беруть гострокінцеві ножиці, проколюють черевну стінку і відрізають всю передню частину тулуба, що звисає, разом з нутрощами. Потім правою рукою захоплюють залишок хребта, а лівою - край шкіри спини і швидким рухом знімають шкіру з обох задніх лапок.
Зняття шкіри з лаПок жаби:
А - зняття шкіри; Б - оголені Задні лапки жаби.
Поклавши препарат на коркову пластинку, піднімають пінцетом куприкову кістку і відрізають її гострими ножицями. Препарат (обидві лапки) вміщують у чисту ванночку і видаляють решту нутрощів, зберігаючи при цьому цілість нервів та м'язів. Заливають препарат фізіологічним розчином для холоднокровних (0,65%-ний розчин кухонної солі) або розчином Рінгера. них слиз, яка потрапила з шкіри жаби.
Підводять один кінець ножиць під залишки хребта, другий (верхній) направляють точно по серединній лінії хребта і розділяють препарат на дві симетричні половини. Щоб виготовити ізольований нервово-м'язовий препарат жаби, треба видалити спочатку клубову кістку і звільнити сідничний нерв від кровоносних судин і тканин, що вкривають його на шляху до стегна. Залишають одну лапку в розчині (про запас), другу кладуть на спинний бік, захоплюють м'яз стегна двома пінцетами або пальцями і розсувають м'язи до стегнової кістки, де лежить сідничний нерв у вигляді товстої шовкової нитки.
Розсуваючи пінцетом м'язову і сполучну тканини, звільняють нерв на всьому протязі, як можна дальше вгору до тулуба і вниз до коліна. Коли препарують нерв, не можна доторкатися до нього металевими предметами, а краще застосовувати скляні гачки або палички.
Біля колінного суглоба перерізають всі м'язи стегна, оголюють стегнову кістку і звільняють її головку із кульшового суглоба. Стегнову кістку використовують для фіксації препарату в кімографі при записуванні скорочування м'яза. Потім відпрепаровують литковий м'яз. Для цього підрізають ахілове сухожилля і, підтягнувши його вгору, звільнюють литковий м'яз від тканин, що його оточують.
Видаляють гомілку, перерізавши її нижній кінець, і одержують готовий нервово-м'язовий препарат, що складається із литкового м'яза, сідничного нерва і стегнової кістки.
При виготовленні препарату треба слідкувати за його вологістю, періодично змочувати фізіологічним розчином.
Нервово-м'язовий препарат жаби: 1- частина хребця;
2- стегнова кістка;
3- Литковий м'яз; 4- сідничний нерв.
Нервово-м'язовий препарат жаби тривалий час зберігає життєдіяльність, якщо йому не дають висихати. Найкраще проводити досліди у вологій камері, а при її відсутності застосовувати теплий фізіологічний розчин.
ДЕМОНСТРАЦІЯ СКОРОЧЕННЯ М'ЯЗА
Беруть литковий м'яз жаби, змочений у фізіологічному розчині. Нижній кінець його укріплюють в затискачі м'язового столика, а до верхнього прив'язують нитку з тягарцем (гиркою 10-20Г).
М'язовий столик з м'язом.
Нитку перекидають через гвинтовий блок м'язового столика. Стрічку шкали установлюють на нульовій поділці. Електроди підводять до м'яза і завдають електричного подразнення шляхом замикання електричного кола ключем. У відповідь на подразнення м'яз скорочується і стрілка м'язового столика відхиляється вправо. Потрібно записати, на скільки поділок відхиляється стрілка м'язового столика при скороченні м'яза та з якою вагою піднімає його тягарець. Подразнювати м'яз можна і кристаликами кухонної солі, змоченими водою. Щоб відповідна реакція наступила швидше, треба препарувальною голкою розірвати сполучнотканинну оболонку (фасцію) м'яза і кристалики солі прикласти на оголені м'язові волокна. Відмітьте і запишіть величину відхилення стрілки шкали м'язового столика при хімічному подразненні.
ЗАПИС СКОРОЧЕННЯ М'ЯЗА
Поодинокі скорочення м'яза можна записати, користуючись установкою, яка складається із штатива і змонтованої на ньому стрілки. Препарат литкового м'яза без нерва одним кінцем закріплюють у верхньому затискачі штатива, а за другий зачіплюють гачок з ниткою, що з'єднана з стрілкою. Електроди приладу підводять щільно до м'яза і ключем замикають та розмикають електричне коло. У відповідь на подразнення м'яз буде. Скорочуватися і піднімати вгору стрілку. При розслабленні м'яза стрілка опускатиметься вниз.
Потім стрілку приладу підводять до барабана кімографа і пускають його в хід на великій швидкості (при малому метельку).
На м'яз наносять електричне подразнення, замикаючи коло ключем або включаючи електроди індукційної катушки без переривника, щоб мати поодинокі удари індукційного струму.
У коло вмикають фіксатор часу, який реєструє момент і тривалість нанесення подразника. На стрічці барабана кімографа дістають криву поодинокого скорочення м'яза - кімограму.
На кімограмі поодинокого скорочення видно, що м'яз починає скорочуватися через 0,01Сек Після нанесення подразнення, тобто після прихованого або латентного періоду. Скорочення м'яза триває 0,04 Сек, Після чого настає розслаблення тривалістю 0,05Сек.
Щоб дістати криву тетанічного скорочення, треба завдати ряд подразнень, що йдуть одно за одним з швидкістю не менше, як 30-40 подразнень за секунду. Кількість нанесення подразнень поступово збільшують. Спочатку наносять подразнення частотою 15 за секунду. Спостерігають криву неповного або зубчастого тетануса. Потім збільшують частоту подразнень до 30-40 за секунду і знову одержують криву повного або досконалого тетануса.