Ринопневмония лошадей

1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Рейтинг 5.00 (1 Голос)

[The eqvine rhinopneumonitis — mare abortion complex, Equine herpesvirus (Equid herpesvirus 1) infection, Mare abortion, Epizootic abortion of mares, Equine «influenza», Equine virus abortion (англ.); Rhinopneumonitis des Pferdes, Virusabort des Studen (нем.)]

Ринопневмония лошадей (РПЛ, вирусный аборт кобыл, половая экзантема лошадей, ринотрахеит лошадей) — остро протекающая контагиозная болезнь, характеризующаяся острым респираторным заболеванием жеребят и абортами у кобыл во второй половине жеребости, которые часто проходят без заметных симптомов и предвестников родов. Болезнь впервые описали в США. Затем ее диагностировали в Германии, Франции, Италии, Югославии, Австрии, Венгрии, в последние годы — в Румынии, Чехословакии, Польше, странах СНГ и России.

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Вирус ринопневмонии (герпесвирус 1-го типа) вызывает острое респираторное заболевание жеребят в возрасте 6—9 месяцев, аборты у жеребых кобыл и паралитический синдром. В естественных условиях инкубационный период в среднем 3—4 недели. Болезнь протекает в респираторной форме и может сопровождаться абортами. Первая форма встречается чаще, поражает животных осенью и в начале зимы. Она характеризуется повышением температуры тела, депрессией, отсутствием аппетита, конъюнктивитом и воспалением слизистой оболочки носа, иногда ринофарингитом. Ринит сопровождается истечением из носа, увеличением подчелюстных лимфоузлов. Легкие поражаются редко. Через 10—15 дней больные выздоравливают. У некоторых животных бывают кашель и затрудненное дыхание вследствие развившейся перипневмонии. В таких случаях болезнь нередко осложняется бактериальной инфекцией, что обычно приводит к летальному исходу.

При наличии в хозяйстве жеребых кобыл ринопневмония может вызывать аборты, причем абортируют как кобылы с респираторной формой болезни, так и не имеющие видимых симптомов болезни. Аборт происходит на 8—10-м месяце жеребости, хотя у некоторых может быть и на 6-м месяцев. Абортируют до 90 % больных животных. При вирусном аборте родовые пути приходят в норму также быстро, как и у здоровых кобыл после родов. Общее состояние кобыл заметно не нарушается. Очень редко бывают осложнения в виде параличей, заканчивающихся гибелью животного. Вирусный аборт редко наблюдают дважды у одной и той же кобылы. Это свидетельствует о наличии иммунитета. Однако описаны случаи повторного аборта через несколько лет.

Для ринопневмонии характерны изменения, обнаруживаемые в органах абортированных плодов или павших вскоре после рождения жеребят. У плодов развивается острый или хронический гепатит, вызывающий их гибель. В печени появляются многочисленные серовато-белые очажки некроза, в грудной полости — серозно-геморра-гическая жидкость, отек легких и выпот фибрина. В мышцах, под капсулой селезенки и печени, на плевре, брюшине, перикарде и эпикарде видны точечные кровоизлияния. Слизистые оболочки плода, особенно конъюнктива, желтушны. При гистологическом исследовании срезов печени, мышцы сердца, эндотелия сосудов, легочных альвеол, эпителия щитовидной железы абортированных плодов очень часто по периферии очагов некроза обнаруживают внутриядерные включения типа А Коудри. Включения окрашиваются ацидофильно в виде гомогенной массы, но иногда в виде нежно-зернистой структуры. Включения считают тельцами вирусной природы. Они имеют важное диагностическое значение.

Помимо абортов, у кобыл вирус вызывает рассеянный менингоэнцефаломиелит. Он характеризуется некротизирующим васкулитом, очаговыми размягчениями в головном и спинном мозге, скоплением лимфоцитов и нейтрофилов в околопозвоночных ганглиях. Иногда наблюдается парез. Описана вспышка атаксии и параличей на конном заводе у чистокровных лошадей, вызванная герпесвирусом лошадей типа 1.

Наблюдали вспышку неврологических заболеваний в школе верховой езды. У лошадей имели место атаксия, парезы. Посмертно установлены геморрагии вдоль спинного мозга, наиболее выраженные в грудном и поясничном сегментах.

Вирус размножается и накапливается в слизистых оболочках верхних дыхательных путей и в легких, вызывая ринопневмонию. У беременных кобыл вирус проникает в матку, плод и околоплодные оболочки, вызывая патологический процесс и аборт во второй половине беременности.

Заболевание лошадей вызывают герпесвирусы трех типов: Equine herpesvirus type 1 — вирус классической ринопневмонии лошадей (вирус Долла), шт. Kentucky D; Equine herpesvirus type 2 — возбудитель коитальной экзантемы (Equine coital exanthema) представлен шт. EHV-2, HKV-2, HBM-7, HKV-4; Equne herpesvirus type 3 — возбудитель цитомегалоподобной инфекции лошадей (Equine cytomegalolike virus)4представлен шт. LK-Plummer-2. Идентифицировано восемь герпесвирусов лошадей: герпес-вирусы лошадей 1—5, 6—8, а также герпесвирус ослов ГВЛ 1—3. Не все вирусьг. вы-зывают клиническое проявление заболевания. Серьезные поражения наблюдаются при инфекции ГВЛ-1 и ГВЛ-4.

Вирусы типов 2 и 3 клеточно связанные, вызывают ЦПД в культуре клеток почки эмбриона лошади, ягненка и кролика с образованием внутриядерных включений. Шт. EHV-2, HKV-2 и HKV-4 образуют синцитий. Equvine herpesvirus type 1 впервые выделили Димок и Эдварде. Вирус РПЛ (EHV-1) имеет два подтипа: ПТ-1 и ПТ-2. Вирус ПТ-1 выделяли из абортированных плодов и новорожденных жеребят, а ПТ-2 — при респираторном заболевании. ПТ-2 в отличие от ПТ-1 не репродуцируется в культуре клеток эмбриона кошек и морских свинок, почки кролика и теленка, не выявлялся в лейкоцитах крови лошадей, слабо размножается и не выделяется из, носоглотки, не вызывал аборта у жеребых кобыл после интраназального введения;

Морфология и химический состав. Вирион содержит центральное ядро размером 60 нм, светлую зону и пограничную мембрану; диаметр вириона около 100 нм. В культуре клеток почки хомяка через 15—18 ч после заражения обнаруживаются вирусные частицы трех типов: мелкие (40 нм), средние (до 100 нм), крупные (до 160 нм); в цитоплазме и вне клеток бывают частицы до 220 нм.

Вирионы могут быть с оболочкой и без оболочки. Используя «мягкие» детергенты (например, нонидент Р-40) или обрабатывая ультразвуком удавалось отделить оболочку вириона. Вирионы, лишенные оболочки, отличаются от частиц с оболочками размерами и плавучей плотностью. Крупные вирусные частицы с оболочкой встречаются в ядре единично, в цитоплазме чаще, а вне клеток в большом количестве.

Вирионы, очищенные центрифугированием и обработкой нуклеазой, имеют константу седиментации в градиенте сахарозы около 200S. Количество ДНК на одну частицу равно 4,75- 1010Д, что составляет свыше 9,2 %. Основания ДНК спарены: аденин приблизительно с равным количеством тимина, гуанин с цитозином. Отношение (А+Т)/(Г+Ц) = 0,78, в то время как для ДНК клетки хозяина оно равно 1,4.

С помощью электрофореза изучен полипептидный состав оболочечных и безоболочечных вирионов, а также их оболочек. В вирионах с оболочками идентифицировано 20 полипептидов с мол. м. от 115 до 13000 Д. Безоболочечные вирионы содержали 14 полипептидов, а сами оболочки три полипептида. При электрофорезе полных вирионов обнаружено три зоны, содержащие липопротеид, и четыре зоны — глико-протеин. По-видимому, все они имеют оболочечное происхождение, так как в безо-болочечых вирионах не выявлялись.

Установлено, что последовательность гликопротеинного гена ГВЛ типа 1 гомологична последовательности гена вируса herpes simplex для гликопротеина ДВ. В геномах дефектных вирионов герпесвируса лошадей типа 1, участвующих в онкогенной трансформации и персистентной инфекции, имеется одна открытая рамка считывания, она кодирует белок с мол. м. 30000 Д. Ген 28 ГВЛ типа 1 кодирует гликопротеины с мол. м. 300 Д. Ген 68 ГВЛ-1 кодирует гомолог Us2. С использованием антисыворотки к N-концевым 206 остаткам Us2 обнаружены белки с мол. м. 43, 44 и 31 кД в клетках, зараженных штаммами RacLll, Ab4 и RacH ГВЛ-1 соответственно. Независимо от размера Us2 включается в вирионы. Us2 расположен в мембранной и ядерной фракциях клеток, зараженных штаммом RacLll, и в оболочке вирионов.

Сконструированы составные белки-продукты слияния зеленого флуоресцентного белка GFP с С-концом целого Us2 или с укороченным Us2 без 16 гидрофобных остатков на N-конце. Оба составных белка обнаружены в плазматической мембране и вблизи от ядер зараженных клеток. Us2 не содержит N - и О-связанных углеводов. Лишенный Us2 мутант LllAUs2 проявляет задержанную кинетику проникновения и образует более мелкие бляшки, чем штамм RacLll, и имеет пониженную патогенностьдля мышей BALB/c. Таким образом Us2 модулирует вхождение и межклеточное распространение ГВЛ-1. Изучена способность белков активировать транскрипцию различных генов ВГЛ-1. Белок EICP22 ГВЛ-1 является самоассоциирующимся белком, образующим во время заражения димеры и комплексы высшего порядка. Изучение набора делеционных мутантов этого белка показало, что для самоассоциации его важны остатки 124—123.

Вирус чувствителен к изменению концентрации водородных ионов. Однако инфекционность его сохраняется при сравнительно широких колебаниях рН. Оптимальный для его хранения рН 6—6,7; при рН ниже 4 и выше 10 вирус быстро инактивируется. Он лучше сохраняется при 4—6 °С, хуже — при 20 °С. В культуральной жидкости остается вирулентным при 56 °С до 10 мин, при 50 °С — 20—30 мин, при 37 °С — от 1,5 до 7 суток, при 4 °С — 7—8 месяцев, при -10—18 °С — 12—14 месяцев. В инфицированной ткани, замороженной при -18—20 °С, сохраняет активность до 2 лет. В тканевых суспензиях, приготовленных на солевых растворах (рН 7—7,4) с 20 % нормальной лошадиной сыворотки, он активен при 4 °С не менее 2 недель; в буферном растворе без добавления сыворотки вирус быстро инактивируется.

Вирус хорошо консервируется 50 %-ным раствором глицерина, оставаясь активным при 4 "С 5 месяцев. Дезоксихолат натрия в разведениях 1:100 и 1:1000 при 22—24 °С инактивирует его в течение 45—60 мин; 1 %-ный этанол, метиловый спирт, гепарин или ЕДТА не влияют на инфекционность культурального вируса. Он чувствителен к действию трипсина, эфира и хлороформа.

АГ структура детально не изучена. КС АГ можно разделить на S (растворимый) и V( вирусный).

АГ Вариабельность и родство. Известны вирусы РПЛ 1-го типа: американский эталонный шт. Kentucky (иммунологически идентичны ему шт. К-69 и С-69) и японский Н-45 (иммунологически идентичны ему шт. Racarmy 183, Hannover 1835 и VI00. Обнаружены субтипы вируса Н-45 и Kentucky. Антигенные взаимоотношения четырех дивергентных штаммов герпесвируса лошадей типа 2 (ГВЛ-2): 86/67, 5FN, 141 и Т-2 и ГВЛ-5 изучены методом ELISAc набором моноклонатьных антител, специфичных для niHKonpoTeHHagB штамма 86/87. Штаммы 86/67 и 5FN более похожи друг на друга, чем штаммы Т-2, 141 или ГВЛ-5. Семь из девяти МКА KgB штамма 86/67 нейтрализуют штаммы 86/67 и 5FN, но не ГВЛ-2, 141, Т-2 и ГВЛ-5. Сравнены полные нук-леотидные последовательности и предсказаны аминокислотные последовательности gB штаммов 86/87, 5FN, 141 и Т-2 ГВЛ-2. У четырех штаммов ГВЛ-2 гомология белков gB составляет 94—96 %. Вариабельные участки gB картированы в трех сайтах, названных I, II и III. Гомология белков gB ГВЛ-2 и ГВЛ-5 равна 77-79 %. Эпитопы семи нейтрализующих МКА к gB ГВЛ-2 картированы в области остатков 30—49 в сайте I. Методом секвенирования изучена вариабельность сайта I еще у шести штаммов ГВЛ-2.

Анализ 10 штаммов ГВЛ-2 показал, что на основании эпитопов для нейтрализующих МКА их можно разбить на две антигенные группы: «86/67-подобную» и «141-подо-бную». Белок gB ГВЛ-5 отличается от всех gB ГВЛ-2 в области остатков 29—74.

Болеют лошади всех возрастов и пород независимо от пола, а также ослы, мулы и пони. Человек, КРС, мелкий рогатый скот и свиньи к вирусу не восприимчивы. Вирус проникает в организм главным образом через органы дыхания и локализуется в верхних дыхательных путях и легких, вызывая симптомы ринита или ринопневмонии. Из первичного места размножения (слизистых оболочек дыхательных путей и конъюнктивы) после фазы вирусемии, соответствующей периоду лихорадки и лейкопении, вирус попадает в матку, плод и околоплодные оболочки, где размножается, вызывая патологический процесс, приводящий к аборту. Заражение плода происходит медленно, поскольку аборт наступает через 1—4 месяцев после респираторной формы болезни. Вирус обладает тропизмом к эпителиальной и эндотелиальной тканям.

Переболевшие ринопневмонией животные могут выделять вирус во внешнюю среду с истечениями из носа и половых органов до 2 месяцев. ГВЛ типа! экскретиру-ется с выделениями из носа, являясь источником заражения для других лошадей.

Вирус обладает выраженной АГ активностью. У реконвалесцентов обнаруживают КСА и ВНА. У переболевших кобыл через 10—14 дней после заболевания индекс нейтрализации сывороток колебался от 3 до 5 lg. У экспериментально зараженных лошадей ВНА образовывались медленнее, но сохранялись дольше, чем КСА. ПА на обнаружено. Для получения АГ в РСК используют очищенный методом бляшек шт. Р-19-Toowoomba (8—10-го пассажа).

Экспериментальная инфекция. Может быть воспроизведена на молодых жеребятах, жеребых кобылах, беременных крольчихах и морских свинках. При внутривенном, интраназальном и интратрахеальном введениях вируссодержащего материала у молодых жеребят появляется типичная картина ринопневмонии (гипертермия, поражение верхних дыхательных путей, лейкопения) и КСА. У экспериментально зараженных лошадей количество лейкоцитов, Т-, В-лимфоцитов снижается. Вирулентный штамм оказывает иммунодепрессивное действие, что позволяет дифференцировать реакцию организма на вакцинный и вирулентный вирусы. У зараженных вирусом кобыл за 7—10 дней, реже за 15—20 дней до аборта, повышается температура тела, удерживающаяся 2—3 дня. Иногда температурная реакция может быть и во время аборта. При внутривенном введении вируса инкубационный период колеблется от 4 до 76 дней (в среднем 22 дня), при инокуляции вируса непосредственно в матку — от 3 до 9 дней, при спонтанном заражении — от 1 до 4 мес. Предшествующая аборту стадия инфлюэнцы при легком ее течении может пройти незамеченной. Кобылы, зараженные после 9 месяцев жеребости, могут принести мертвого или нежизнеспособного жеребенка. У зараженных кобыл появление симптомов болезни коррелирует с выделением вируса с носовыми секретами. Виремия обычно связана с лейкоцитами крови, проявляется как непродуктивная латентная инфекция этих клеток и длится в течение 9 дней.

Латентная вирусная инфекция выявлялась также и в моноцитах. Замораживание и оттаивание лейкоцитов разрушало их инфекционность, но добавление к лейкоцитам ДМСО до замораживания предотвращало инактивацию вируса. Беременные морские свинки абортируют через 3—8, а иногда и через 15—20 дней после интраперито-неального заражения. Удается заразить хомячков 3—4-дневного возраста, новорожденных котят, мышей и воспроизвести клиническую картину энцефаломиелита с характерными внутриядерными включениями в клетках нейроглии. Наиболее чувствительны к ринопневмонии новорожденные хомячки. Они погибают через 2—6 дней после внутрибрюшинного или интраназального заражения вируссодержашей суспензией, приготовленной из легких или печени абортированных плодов. Вирионы, лишенные оболочки, патогенны только для хомячков и в больших дозах.

Культивирование. Для культивирования и пассирования вируса используют мышат-сосунков и хомячков (внутрибрюшинное заражение), КЭ 8—12-дневного возраста (в желточный мешок, аллантоисную полость или амнион), а также культуры клеток почечной ткани различных животных (лошади, теленка, поросенка, собаки, овцы), тестикулов бычков или их эмбрионов. Наиболее чувствительна культура клеток почки лошади, особенно молодого жеребенка. Вирус размножается также в культурах некоторых перевиваемых линий клеток (HeLa, KB, Детройт-6, РК-15). Оба типа T-I (НН-1) и II (ТН-20) удалось адаптировать к культуре клеток почки свиней. По чувствительности к вирусу РПЛ первичные и перевиваемые линии клеток можно разделить на пять групп в сторону ее снижения: 1) почка свиньи (ПС) и почка лошади (ПЛ); 2) почка теленка (ПТ), тестикулы теленка (ТТ), почка хомячка (ПХ), ВНК-211; 3) перевиваемые линии клеток: HeLa, TL (амнион человека), Lu 106 (легкие человека), AND (почка обезьяны), КЛ (клетки роговицы кролика); 4) фибропласты КЭ; 5) ML (мышиные фибропласты).

Клетки 1-й группы пригодны для выделения, накопления и пассажей всех изученных штаммов вируса РПЛ. В этих культурах на 3—5-е сутки после заражения вирус уже с первого пассажа проявляет ЦПД; образуются очаги округлых клеток с последующим разрушением всего клеточного пласта. Развитие ЦПД в культуре клеток ПС и ПЛ завершается их полным лизисом. В клетках 2-й группы вирус размножается, но ЦПД наступает медленно, без полного лизиса культуры. По мере адаптации титр вируса повышается и к 4—5-му пассажу достигает 104.75—105>° ТЦД50/МЛ.

В культурах клеток 3-й группы размножаются не все штаммы вируса РПЛ. В клетках 4-й группы вирус размножается слабо и не вызывает ЦПД. В культуре клеток печени КЭ и почечного эпителия морских свинок хорошо развивается болгарский шт. 1605. И наконец, культура клеток мышиных фибробластов, относящаяся к 5-й группе, вообще не пригодна для размножения вируса. Однако в клетках почки мышей вирус герпеса лошадей типа 3 может размножаться и лучше репродуцироваться при 33,7 °С, чем при 36 или 38 °С. В клетках паренхимы печени КЭ, в культурах клеток, в которых хорошо репродуцируется вирус РПЛ, находят ацидофильные внутриядерные включения типа А Коудри, не отличимые от тех, какие обнаруживаются у больных лошадей. Вирус, прошедший несколько пассажей в культуре клеток ПЭК, размножается в перевиваемых линиях клеток почки телят и овец, вызывая характерное ЦПД.

Вирус, пассированный в культуре клеток почки кролика, козы и свиньи, не пассировался в культурах клеток почки морской свинки, хомячков и фибробластов КЭ. Получены дефектные интерферирующие частицы (ДИЧ) вируса в серийных пассажах его в культуре фибробластов мыши (линии ML) с высокой множественностью инфекции. При выделении вируса многие штаммы требуют предварительной адаптации к той или иной системе культивирования, особенно это относится к культивированию вируса на хомячках, мышатах-сосунках и КЭ. В 1966 г. предложен метод получения бляшек в субкультуре клеток почки коровы с жидким покрытием. Метод применяют для титрования ВНА.

Изучен исход инокуляции in vitro моноцитов периферической крови лошадей ГВЛ-1. Показано, что ГВЛ-1 реплицируются в моноцитах, но ограниченно. Антигены ГВЛ-1 найдены в 8,7 % МПК через 12 ч после заражения. Инфекция продуктивна в 0,16 % МПК. В популяции покоящихся лимфоцитов заражается 0,9% клеток и 0,05 % дает инфекционные вирусы. После предварительной стимуляции различными митогенами число зараженных лимфоцитов увеличивается в 4—12 раз. Чувствительными клетками являются Т-лимфоциты. В стимулированных митогенами лимфоцитах антигены ГВЛ-1 экспрессируются на плазматической мембране. Антисыворотка против активированных лошадиных эндотелиальных клеток, которые содержат на поверхности молекулы с мол. массой 116 кД, 97 кД, 42 кД и 38 кД были использованы для изучения роли эндотелиальных молекул прикрепления при инфекции ВГЛ-1.При естественной инфекции эндотелиальных клеток лошадей участвуют сложные факторы, определяющие тропизм вируса.

ГА И ГАд Свойства. Вирус агглютинирует эритроциты лошади и морской свинки при 4 и 37 "С Активность ГА не связана с липидами, он является интегральной частью вирусной оболочки, а не растворимым АГ, как предполагалось раньше. Он не инактивируется при 56 °С, сохраняется при 4 и 37 °С, а также при воздействии нейра-минидазы холерного вибриона, не нейтрализуется сыворотками лошадей-реконва-лесцентов, но нейтрализуется гипериммунными сыворотками крови кроликов. ГА-активность, обусловленная участием дисульфидных групп, разрушается протео-литическими ферментами (трипсином, альфа-хемотрипсином и проназой), резистентна к действию растворителей липидов (хлороформу, эфиру) и фосфолипазе С.

В свежих препаратах вируса титры ГА прямо пропорциональны инфекционности, и 1ГАЕ приравнивается к 107 БОЕ в клетках РК-15. В очищенных препаратах вируса 1 ГАЕ эквивалентна 0,65 мг белка. При внесении в инфицированную культуру клеток с выраженным ЦПД отмытых эритроцитов лошади наблюдается очаговая ГАд. Однако этот феномен проявляется недостаточно четко и не может служить надежным диагностическим тестом.

Источники и пути передачи инфекции. Источник инфекции — больное животное, выделяющее вирус через дыхательные пути и особенно с абортированным плодом. В естественных условиях вирус передается воздушно-капельным путем. Факторами передачи инфекции служат загрязненные вирусом корма, вода, подстилка и т. п. Жеребцы могут стать переносчиками вируса при коитусе. Вероятно, собаки, лисицы и птицы могут разносить вирус вместе с кусками абортированных плодов из одного хозяйства в другое. Основные вспышки эпизоотических абортов у лошадей связаны с ГВЛ-4. ГПЛ-4 удается выделить после гибели животного из тканей, взятых в участке пораженных нервов. Уровень инфицированности ГВЛ-1 постепенно повышается с возрастом, достигая доминирующих значений у лошадей старших возрастных групп. Распространенность ГВЛ-1 была значительно выше среди лошадей арабской и мангаларгской пород. ГВЛ-1-инфицированные животные встречались во всех районах Бразилии.

Иммунитет и специфическая профилактика. У переболевших животных развивается краткосрочный иммунитет, причем против абортивной формы он бывает продолжительнее, чем против респираторной (обычно не более 4 месяцев). Для профилактики РПЛ применяют инактивированные и живые вакцины.

Живые вакцины. В РФ используют живую вакцину из шт. СВ/69. вируса РПЛ. Вакцинацию кобыл проводят внутримышечно на 3—4 месяце жеребости и ревакцинируют спустя 3 месяца. Прививка жеребых кобыл против РПЛ вакциной из шт. СВ/69 вызывает у них умеренную поствакцинальную реакцию и не влияет отрицательно на состояние жеребости. Способ введения вакцины существенно не влияет на титр гуморальных AT, тогда как титр секреторных AT был выше при интраназальном применений. Жеребята, имеющие поствакцинальные ВНА в титре 1:8—1:16 и анти-ГА в титре 1:16—1:32, устойчивы к контрольному заражению вирулентным вирусом РПЛ. У лошадей образуются секреторные и гуморальные AT и стимуляция В - и Т-лимфоцитов. Генетическое изменение вируса особенно быстро происходит при культивировании его в клетках неестественного хозяина. Преимущественно применяют вакцину из шт. RAC-H, полученного адаптацией вируса к сирийским хомячкам, а затем длительно пассированным (360 раз) в первичной культуре клеток почки телят. В Австрии используют вакцину из шт. ВС, прошедшего 53—56 пассажей в первичной культуре клеток тестикул поросят. Помимо того получен аттенуированный штамм вируса (ГВЛ-4), репродуцированный в первичной культуре клеток поросенка в присутствии мутагена 5-йод-2-дизоксиуридина).

Живая вакцина, приготовленная из мелкобляшечного варианта ГВЛ-4, при подкожном введении по 0,5 жеребятам и 1,0 мл взрослым лошадям создавала напряженный иммунитет до 1 г. Мутант ГВЛ-4 оказался нереверсибельным. Случаев абортов, заболевания или вирусоносительства у привитых животных не наблюдали. Лиофилизированная вакцина сохраняла свои свойства в течение 2 лет. Более выражены протективные свойства при использовании бивалентной вакцины, содержащей оба вируса: ГВЛ-1 и ГВЛ-4. Непатогенкый вакцинный штамм RacH ГВЛ-1 по сравнению с родительским вирулентным штаммом RacL 11 имеет мутации в гене IR6, смежном гене US2 и в гене гликопротеина gB. Мутированные гены у RacH заменили на такие же гены дикого типа из штамма RacL 11. Эти замены не придают штамму RacH фенотип вирулентности. Таким образом, аттенуация вакцинного штамма RacH ГВЛ-1 вызвана только отсутствием гена IR6 и кодируемого им белка.

Инактивированные вакцины. Иммуногенные препараты получены с глютаральде-гидом и адъювантов СТС. Вакцина обладала защитным эффектом для новорожденных жеребят, особенно если лошадей реиммунизировали на 6—7 месяце жеребости.

Во Франции применяют инактивированную 3-валентную вакцину — резекван, приготовленную из вирусов гриппа, РПЛ и реовирусов с использованием ГОА в качестве адъюванта. Одно - и многократное внутримышечное введение инактивирован-ной очищенной вакцины против гриппа и РПЛ, хорошо переносилось животными. Высокий уровень поствакцинальных AT сохранялся в течение 6 месяцев.

В Польше для вакцинации лошадей используют вакцинные препараты Equivac RP, Prevaccinol и RPK. Иммунизация успешна в случаях, когда кобыл вакцинируют до развития беременности по следующей схеме: до беременности 1 - я инъекция вакцины, а 2- и 3-я — на 3—4 и 7—9-месячной беременности соответственно. Для получения иммуногенного стимулирующего комплекса (ИСКОМ) использовали очищенный ВГЛ, стабилизированный детергентом п-деканоил-п-метилгли-козидом. Препарат содержал все основные вирусные гликопротеины в соотношении, аналогичном их содержанию в интактном неразрушенном вирусе. Иммунизация ИСКОМ индуцировала у хомяков антительный ответ к индивидуальным вирусным гликопротеинам и полипептидам. Хомячки, вакцинированные двукратно с интервалом в 6 недель были полностью защищены от заражения 100 ЛД50 ГВЛ-1.

Описаны мутанты ГВЛ, у которых белок gM полностью отсутствует или модифицирован и нефункционален по иммуномодуляторной активности. Эти мутации ГВЛ могут быть применены для улучшения иммунного ответа, вызванного вакциной ГВЛ и направлены против заражения диким типом. Предложены методы, позволяющие различить животных, зараженных ГВЛ дикого типа от животных вакцинированных мутантами ГВЛ.

Иммуногенность вакцин, динамика появления и исчезновения КСА у вакцинированных животных и связь между титрами AT и иммунитетом изучены недостаточно. Методы серологической оценки поствакцинального иммунитета не разработаны. У зараженных вирусом РПЛ установлено снижение количества Т - и В-лимфоцитов. Иммунодепрессивное действие свойственно только вирулентному штамму. Этот признак позволяет дифференцировать реакцию организма на вакцинный и вирулентный вирусы РПЛ. Установлено, что при подкожном или внутрикожном введении живой вакцины СВ/69 появляются КСА, максимальные титры которых отмечали через 2—4 недели после прививки. Культуральная вирус-вакцина индуцирует ВНА, которые обнаруживаются на 14-й день после иммунизации. Уровень их у привитых живой вакциной СВ/69 лошадей повышался до 30—40 дней и далее, незначительно снижаясь, выявлялся до 6 месяцев. Колостральный иммунитет у жеребят до 3 недель соответствовал уровню материнского, затем титр AT снижался, но еще сохранялся до 2—3 месяцев. В отношении связи титров AT с резистентностью животного к экспериментальному заражению, известно лишь, что титр КСА коррелирует с устойчивостью животных к заражению, а ВНА оказались слабым индикатором устойчивости.

Что касается связи титров AT с вирусоносительством и вирусовыделением, то известно лишь, что выделение вируса после заражения не связано с уровнем AT до инфицирования. Двукратно привитые жеребята были чувствительны к экспериментальному заражению: температурная реакция и продолжительность экскреции вируса у них не отличались от таковой в группе контрольных животных, но количество экс-кретируемого вируса было меньшим. Виремия в присутствии ВНА в крови указывает на то, что вирус не нейтрализуется AT, так как он связан с лейкоцитами и вместе с ними попадает в плод, поражая его. Аборты наступают в одни и те же сроки, независимо от содержания в крови ВНА. После аборта титр AT может повышаться.


Ринопневмония лошадей - 5.0 out of 5 based on 1 vote

Добавить комментарий


Защитный код
Обновить