Спинномозговая жидкость и ее диагностическое значение

1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Рейтинг 0.00 (0 Голоса)

Вопрос о происхождении спинномозговой жидкости до последнего времени не является окончательно решенным. Спинномозговая жидкость представляет собой среду, которая омывает наружную поверхность мозга и его желудочков. Возникая в желудочках и сплетениях мозга, спинномозговая жидкость (ликвор) удаляется через вены и лимфатические сосуды. Основной задачей ликвора является доставка питательных веществ, необходимых для нормальной функции мозга и удаления отработанных веществ; кроме того, ликвор предохраняет мозг от различного рода механических повреждений. Окружая мозговое вещество, он отделяет мозг от черепной коробки и выполняет тем самым роль буфера.

Существенное значение имеет барьерная роль спинномозговой жидкости. Установлено, что вещества, поступающие в кровь, не все проходят в спинномозговую жидкость. В то время как алкоголь, морфий и хлороформ проходят в ликвор, иод, мышьяк, ртуть и некоторые другие вещества не проходят. Это важное в биологическом отношении избирательное свойство, предохраняющее центральную нервную систему от химических ядов, и получило название гемато-энцефалического барьера.

Вначале предполагали, что этим свойством обладают мягкие мозговые оболочки, в настоящее время полагают, что «барьер» находится на границе сосудов и мозга, а также на границе сосудов и паренхимы мягких оболочек. Анатомически «барьер», повидимому, связан с эндотелием сосудов мозга—его капилляров, обладающим в отличие от эндотелия сосудов других участков тела избирательной способностью.

В клинической медицине исследованию ликвора придается большое значение. По изменениям ликвора представляется возможным делать заключение о состоянии мозга и мозговых оболочек. В ветеринарной практике до сих пор еще не изучены нормальные показатели по отдельным видам животных. В отношении патологии существуют разрозненные наблюдения, что не позволяет с достаточной полнотой оценить эффективность этого метода исследования. Наиболее полные показатели получены для лошади и крупного рогатого скота, у которых исследование ликвора производилось как в норме, так и при патологических процессах.

Пункционная игла Синева

Рис.

Пункционная игла Синева.

Метод прижизненного получения спинномозговой жидкости. У лошади спинномозговую жидкость получают методом субокципитального или затылочного прокола и цервикальной пункцией. Как показывает довольно значительный опыт автора, наиболее приемлемым методом является цервикальный, предложенный В. Г. Зайцевым. Взятие ликвора производится на стоящем животном. Для прокола используется игла Вира, игла Синева, а также инъекционная игла длиной не менее 6 см. Прокол производится между вторым и первым шейными позвонками в точке, где мысленно пересекаются линии, проведенные от крыльев атланта и соединяющие между собой его углы. Животное фиксируется с помощью закрутки, а у больных животных, в стадии угнетения, пункция возможна и без фиксации. Подготовка места операции состоит в выстригании шерсти и смазывании кожи настойкой иода. При проколе твердой мозговой оболочки создается осязательное впечатление, такое как будто бы прокалывается пергаментная бумага. Это своеобразное ощущение и служит критерием для прекращения дальнейшего вкалывания иглы. Мандрен после этого извлекается и ликвор вытекает каплями, а при повышенном давлении—струйкой.

Окципитальный прокол производится на поваленном животном.
При надлежащей фиксации головы, по Синеву, прокол возможен на стоящей дошади при условии устранения кивания головой (при ведение и отведение), которое представляет большую опасность при проколе. Местом операции является «ямка», на которой лежит ремень уздечки. Ямка расположена на расстоянии 5—6 см от гребня затылка и определяется легко при давлении пальцем. Грива и шерсть перед проколом удаляются, кожа очищается спиртом и дезинфицируется настойкой иода. Острая игла с просветом, закрытым мандреном, вкалывается в ткани гребня до мембраны, прикрывающей foramen occipitalis magnum.

В зависимости от величины животного, игла погружается в глубь тканей на 4,5—6,5 см. При проколе твердой мозговой оболочки получается то же ощущение, как и при цервикальном проколе. Показателем правильного введения иглы в субокципи-тальное пространство служит выделение прозрачного ликвора. Синеву у лошади удавалось получить 50—80 мл ликвора. Окципитальный прокол Синев производит иглой собственной конструкции, изготовленной на заводе «Красногвардеец». Как при цервикальном, так и при окципиталь-ном проколе опасность представляет повреждение мозговой субстанции кончиком иглы с последующим кровоизлиянием и значительным разрушением мозгового вещества. При известной предосторожности и навыке техника прокола несложна и вполне применима в клинической практике. Люмбальная пункция производится на поваленном и хорошо зафиксированном животном.

У лошадей и коров, находящихся в стоячем положении, отверстие между последним поясничным и первым крестцовым позвонком большое и прощупывается хорошо. В лежачем положении животного ямка выражена слабо, а потому пункцию проводить довольно трудно. Люмбальная пункция делается иглами длиной 15—19 см и толщиной 2—2,5 мм.

Надежным признаком попадания иглы в субарахноидальное пространство является истечение цереброспинальной жидкости редкими каплями. У здоровых лошадей и крупного рогатого скота за один раз можно получить от 15 до 45 мл ликвора исследование физических свойств ликвора. Исследование состоит из определения удельного веса, цвета, прозрачности, запаха и консистенции.

Цвет и прозрачность определяются осмотром. Для этого в цилиндр или пробирку наливают некоторое количество ликвора. Цвет определяется сравнением с дистиллированной водой, налитой во вторую пробирку. Прозрачность определяется рассматриванием ликвора в проходящем свете. Пробирка при этом должна быть совершенно чистой и прозрачного стекла.

Ликвор здоровых животных представляет собой прозрачную бесцветную жидкость, похожую на воду. Ликвор, постоявший в помещении в течение 10— 12 часов, дает опалесценцию, а при более длительном хранении мутнеет. Примесь желчных пигментов придает ликвору желтоватый цвет. При кровоизлияниях в субарохноидальном пространстве ликвор становится красным или буровато-красным. При гиперемии головного или спинного мозга ликвор приобретает розовый или розовато-желтый цвет. При тяжелой форме пироплазмоза, нутталлиоза и лептоспироза ликвор окрашивается в желтый цвет. При гнойных менингитах и энцефалитах ликвор бывает мутным.

Ликвор здоровых животных имеет жидкую консистенцию и переливается из одного сосуда в другой, как вода. Запах его определяется органолептически. Ликвор здоровых лошадей и крупного рогатого скота запаха не имеет. Ликвор, полученный в количестве 150—250 мл и собранный в стеклянный сосуд, имеет слабо выраженный запах свежего мяса. При уремии ликвор имеет запах мочевины. Гнилостный запах отмечается при длительном хранении в помеще-мии с температурой 15—18° и при гнойном менингоэнцефалите у лошадей.

Удельный вес ликвора определяется с помощью пикнометра, весовым способом при сравнении с дистиллированной водой. Удельный вес ликвора равняется у лошади 1,000—1,007; у крупного рогатого скота 1,006—1,008; у овцы и козы 1,004—1,008; у верблюда 1,003—1,007; у собаки 1,006—1,0069; у кролика 1,004—1,006; у кошки 1,005—1,007. При тяжелой форме энцефаломи-элита и гнойном менингоэнцефалите лошадей удельный вес ликвора повышается. То же отмечается у коров при злокачественной катаральной горячке. Удельный вес ликвора, полученного при люмбальной пункции, выше, чем при окципитальной и цервикальной.

Исследование химических свойств ликвора. При химическом исследовании определяется реакция ликвора, поверхностное натяжение, криоскопия, вязкость, резервная щелочность, общее количество белка, глобулинов, сахара, калия, кальция, хлоридов, оксидативные и коллоидные свойства.

Реакцию ликвора определяют колориметрическим методом. Концентрация водородных ионов рН в ликворе животных представляет собой стойкую величину и при многих заболеваниях она сохраняет относительное постоянство. У лошадей рН ликвора равняется 7,4—7,6, у крупного рогатого скота 7,4—7,6, у овец и коз 7,3—7,4, у верблюдов 7,6—7,8, у собак 7,4—7,6, у кроликов 7,4—7,5 и у кошек 7,4—7,6.

При энцефаломиэлите и паралитической миогемоглобинурии у лошадей, а также у собак, страдающих сахарным мочеизнурением, отмечается ацидоз. рН ликвора при этих заболеваниях колеблется в пределах 6,91—6,98.

Алкалоз в ликворе отмечен у собак при бешенстве и эпилепсии.

Поверхностное натяжение ликвора определяется с помощью сталагмометра. Поверхностное натяжение ликвора у лошади 1,042—1,047, у крупного рогатого скота 1,016—1,032, у овец и коз 1,009— 1,035, у верблюдов 1,014—1,028, у собак 1,012—1,021, у кроликов 1,013— 1,031. Понижение поверхностного натяжения отмечено при тяжелой форме пироплазмоза крупного рогатого скота и при заболеваниях с симптомами уремии у лошади..

Криоскопию ликвора производят для определения молекулярной концентрации и осмотического давления путем установления точки замерзания. Определение производится в аппарате Бекмана.

У домашних животных получены следующие показатели изотонии ликвора: у лошади 0,54—0,56, у крупного рогатого скота 0,54—0,55, у овец и коз 0,55—0,56, у верблюдов 0,53—0,54, у собак 0,52—0,53, у кроликов 0,53—0,56.

Понижение точки замерзания ликвора отмечено у лошадей с альвеолярной эмфиземой и с отеком легких при отравлении сернистым ангидридом при газоокуривании.

Вязкость ликвора определяют вискозиметром Детермана или Гесса при температуре + 20°.

Вязкость ликвора по отношению к дистиллированной воде равняется: у лошадей 1,017—1,029, у крупного рогатого скота 1,019—1,029, у овец и коз 1,016—1,026, у верблюдов 1,018—1,028.

Повышение вязкости ликвора отмечается при пироплазмозе, эмфиземе легких, крупозной пневмонии, плеврите и других заболеваниях. Понижение наблюдали при истощении лошадей и при родильном парезе крупного рогатого скота.

Резервная щелочность в ликворе определяется газометрическим методом. У клинически здоровых животных резервная щелочность (в объемных процентах С02) характеризуется следующими показателями: у лошади 50—57, у крупного рогатого скота 46,9—53, у овец 49—52,6, у верблюдов 51,1—59,2, у собак 42—50, у кроликов 41—48,5.

Резервная щелочность в ликворе снижается у лошадей при энцефаломи-элите и паралитической  миогемоглобинемии. Повышение щелочного резерва отмечено при бешенстве и эпилепсии собак.

Химические свойства ликвора различных животных приводятся нами по данным А. И. Федотова.

Определение количества белка в ликворе производится по методу Эсбаха—Ниссля, Робертса—Стольникова и с помощью рефрактометрии.

Метод Эсбах а-Н и с с л я. Определение основано на выпадении белка в осадок при смешивании ликвора с реактивом Эсбаха (1,0 пикриновой кислоты, 2,0 лимонной кислоты, 100,0 дистиллированной воды). Определение производится в центрифужных пробирках Ниссля. Нижний конец проби-рочки оттянут в узкую слепую трубочку, разделенную черточками на 10 делений емкостью 0,01 мл. Емкость всей тоненькой трубочки равняется 0,1 мл.

На расширенной части пробирки нанесены деления, обозначенные цифрами 2 и 3. Для определения белка в пробирку набирается до метки 2 (2 мл) спинномозговой жидкости и 1 мл реактива Эсбаха (до метки 3). Жидкость тщательно смешивают и центрифугируют в течение 30—60 минут до постоянного уровня осадка. Каждое деление узкой слепой трубочки соответствует 0,02% Белка.

Метод Робертса—С тольникова. В основе метода лежит выпадение белка под действием азотной кислоты. В качестве реактива используется кислота удельного веса 1,15—1,20. Для разведения используется физиологический раствор поваренной соли.

Вначале производится разведение ликвора на физиологическом растворе в отношении 1 : 5; 1 : 6; 1 : 7,5 и т. д. (схема Грахе), после чего подслаивается азотная кислота. Результат определяется через 3 минуты просмотром проб на черном фоне. Количество белка определяется по прилагаехмой таблице, стр. 375.

Глобулиновые реакции имеют большое практическое значение, так как дают возможность выявлять органические поражения нервной системы. Основаны они на том, что под влиянием некоторых реактивов глобулины выпадают в осадок, в то время как альбумины остаются в растворе. Выпадение глобулинов при повышенном процентном их содержании в ликворе обусловливает или появление опалесценции, или ясно выраженного помутнения.



Основной раствор 1 : 5

Физиологический раствор

Разведенипе

Содержание белка

(в %) при появлении кольца через 3 минуты

0,5

-

1:5

1/6

0,45

0,09

1:6

1/5

0,4

0,2

1:7,5

1/4

0,3

0,3

1:10

1/3

0,2

0,4

1:15

1/2

0,1

0,4

1:25

5/6

0,1

0,6

1:35

1 1/16

0,1

0,7

1:40

1 1/3

0,1

0,8

1:45

1,5

0,1

0,9

1:50

12/з

0,1

1,1

1:60

2

0,1

1,3

1:70

21/з

0,1

1,4

1:75

2 1/2

0,1

1,5

1:80

22/з

0,1

1,7

1:90

3

 

Все глобулиновые реакции с ликвором здоровых животных дают отрицательные показатели. Лишь реакция с сернокислым аммонием у здоровых лошадей дает слабую опалесценцию. Поэтому реакция с сернокислым аммонием при исследовании лошадей не используется, но она с успехом может быть применена при исследовании ликвора крупного рогатого скота и особенно собак.

Реакция Нонн е-А пельта. К 1 мл свежевзятого ликвора добавляют равный объем насыщенного раствора сернокислого аммония (Ammonii sulfurici pur 85,0, Aq. destillati 100 мл), хорошо смешивают и оставляют-пробирку на 4—5 минут, после чего отмечают результаты реакции по следующей шкале.

Сильное помутнение Среднее помутнение

.... ++++

Среднее помутнение.................................................................................................... +++

Ясная опалесценция................................................................................................. ++

Слабая опалесценция +

Прозрачность................................................................................................................ —

Реакция Панд и. В качестве реактива используется 10 г кристаллической карболовой кислоты, разведенной в 100 мл воды. Реактив после хорошего смешивания оставляют на 10 часов в термостате при температуре 38°, после чего сохраняют 3 дня при комнатной температуре. В качестве реактива используется отстоявшаяся прозрачная жидкость.

Реакция производится в часовом стекле, помещенном над отверстием в черном ящике, освещенном изнутри электрической лампочкой. В часовое стекло набирается 1 мл карболовой жидкости, затем из пипетки по краю стекла осторожно опускают капли ликвора. Реакция учитывается по интенсивности образования молочно-белого облачка, переходящего в муть.

Реакция Вейхбродта. В качестве реактива используется раствор сулемы 1 : 1 000. В уленгутовскую пробирку набирают 0,7 мл ликвора и добавляют 0,3 мл сулемового раствора. При наличии глобулинов получается помутнение различной степени выраженности в зависимости от процентного их содержания. При оценке реакции пользуются той же шкалой, что и при оценке реакции Нонне-Апельта.

Глобулиновые реакции зависят от общего количества белков и главным образом от глобулинов. Отношение количества глобулинов к количеству альбуминов носит название белкового коэффициента.

Для определения белкового коэффициента берут две градуированные пробирки и наливают в них по 0,6 мл ликвора. В одну пробирку добавляют 0,3 мл реактива следующего состава: 1 г пикриновой кислоты, 2 г лимонной кислоты в 100 мл воды; в другую пробирку добавляют 0,6 мл насыщенного раствора сернокислого аммония. После центрифугирования в течение 30 минут определяется число делений, занимаемых осадком.

В первой пробирке в осадок выпадают глобулины и альбумины, следовательно, «первое число» указывает общее количество белков. Во второй пробирке в осадок выпадают глобулины—«второе число». В результате вычитания из «первого числа» получают количество альбуминов.

У клинически здоровых лошадей белковый коэффициент ликвора равен 0,52—0,72, у крупного рогатого скота 0,50—0,69. При депрессивной форме энцефаломиэлита лошадей белковый коэффициент равняется 0,43—0,48, при буйной форме—0,70—0,84. При родильном парезе и столбняке белковый коэффициент находится в пределах нормы.

Оксидазные реакции. В основе этих реакций лежит окисление ликвора и изменение цвета реактива.

Реакция Бенедикта-Т у р з о. В качестве реактива используется 1%-ный раствор щавелевой кислоты и 1%-ный раствор марганцевокислого калия. Первый и второй реактивы изготовляются на дважды перегнанной дистиллированной воде. Реакция очень чувствительна.

К 0,5 мл исследуемого ликвора подливают 2 мл 1 %-ного раствора щавелевой кислоты и после взбалтывания добавляют одну каплю 1 %-ного раствора марганцевокислого калия. Смесь тщательно взбалтывают. Для контроля берется вторая пробирка с дистиллированной водой, смешанной с теми же реактивами. Количество дистиллированной воды и реактивов такое же, как в первой пробирке ликвора и реактивов. Наблюдение за изменением цвета жидкости ведется в течение 8 минут.

У здоровых животных ликвор после обработки реактивами окрашивается в нежнокрасно-фиолетовый цвет. Такая же окраска получается й в контрольной пробирке. При менингитах ликвор окрашивается в коричнево-желтый, красно-желтый и желтый цвет.

Реакция Фридмана является видоизменением пробы Бенедикта. В качестве реактивов используется 1%-ный раствор марганцевокислого калия и 20%-ный раствор трихлоруксусной кислоты. Для приготовления реактивов используется дважды перегнанная дистиллированная вода.

К 1 мл ликвора прибавляют каплю 1 %-ного раствора марганцевокислого калия и 1—2 капли 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Ликвор здоровых животных в течение длительного времени сохраняет яркофиолето-вую окраску.

При негнойных менингитах ликвор окрашивается в красновато-желтый, а при гнойных—в светложелтый цвет.

Из других химических свойств ликвора, при некоторых патологических процессах, имеет значение определение сахара, калия, кальция, хлоридов и коллоидных свойств.

Микроскопия осадка. Для врачебной практики большой интерес представляет цитологическое исследование осадка ликвора.

Количественное определение форменных элементов ликвора можно проводить по методу Розенталя, пользуясь для этого специальной камерой; можно также с успехом использовать счетные камеры с сеткой Горяева или Пред-теченского. Для большей точности подсчет производится дважды, а затем находят среднее арифметическое.

Для подсчета форменных элементов в камере их необходимо окрасить смесью следующего состава: Methyl-violet 0,1 Ac. acetici 2,0, Aq. destillati 5,0.

В лейкоцитарный смеситель до метки 1 набирают красящую смесь, а до метки 11—свежевзятый ликвор. После тщательного перемешивания и выдерживания в течение 10—12 минут, для лучшего прокрашивания форменных элементов, каплю ликвора наносят на сетку камеры, удалив предварительно первые 2—3 капли. После подсчета форменных элементов в камере число их определяют в 1 мм3 по формуле:

Найденное количество X Разведение

Объем камеры

Для качественного определения форменных элементов ликвор предварительно центрифугируют в течение 30 минут и из осадка делают «толстую» каплю, которую высушивают на воздухе и фиксируют 15 минут в спирт-эфире. Зафиксированный препарат окрашивается раствором метиленовой синьки.

Под микроскопом просматривается 5—6 полей зрения и вычисляется, среднее количество. По Федотову, количество форменных элементов в одном поле зрения: у здоровых лошадей 0—1, у крупного рогатого скота 0—2, у овец и коз 1—2, у собак 0—1, у кроликов 1—2.

У лошадей при буйной форме энцефаломиэлита количество форменных элементов достигает 50—80, а иногда и больше. От 25 до 60 клеток отмечено при тепловом и солнечном ударе, злокачественной катаральной горячке крупного рогатого скота и эпилепсии собак.

Незначительное увеличение (12—17 клеток) наблюдается у собак при чуме и у крупного рогатого скота в период залеживания перед родами. Незначительное увеличение возможно также при повторных цистернальных пункциях. При бешенстве и столбняке количество форменных элементов находится в пределах нормы.

У здоровых животных в осадке ликвора встречаются средние и малые лимфоциты. При воспалительных процессах мозга и мозговых оболочек, а также тепловом и солнечном ударе, кроме лимфоцитов, обнаруживаются нейтрофильные клетки.