Этапы изготовления и контрастирования гистологических препаратов:

1) Отбор материала из различных органов и тканей осуществляется с учетом особенностей их анатомического и гистологического строения.

2) Фиксация материала обеспечивает стабилизацию клеточных и неклеточных структур, предотвращает их саморазрушение (аутолиз).

Фиксаторами могут быть различные жидкие химические вещества. Различают фиксаторы простые (спирты: этиловый и метиловый, раствор формальдегида, глутаральдегид, кислоты осмиевая, пикриновая, уксусная, растворы некоторых солей тяжелых металлов) и сложные, которые состоят из нескольких простых фиксаторов (жидкость Карнуа, Буэна и др.).

3) Уплотнение материала достигается тем, что материал пропитывают более плотным веществом для предотвращения деформации структур исследуемого объекта при изготовлении с него очень тонких срезов. Для этого в световой микроскопии применяют растворенный в ароматических углеводородах и расплавленный парафин, спиртовой раствор целоидина или замораживают объект в криостате.

В электронной микроскопии уплотнение объекта достигается пропиткой его эпоксидными смолами.

4) Для изготовления срезов применяют микротомы (санные, роторные, замораживающие) и ультратомы. Для этого используют стальные микротомные ножи, изготовленные из высококачественной закаленной стали. Для получения ультратонких срезов применяют ножи из специального шведского стекла или алмазов.

5) Контрастирование гистологических срезов осуществляется специальными красителями, которые подразделяются на 3 основные группы:

Основные (щелочные) красители (гематоксилин, азур, сафранин, основной коричневый, толуидиновый синий, галлоцианин, тионин, метиловый зеленый, метилвиолет и др;)

Кислые красители (эозин, эритрозин, кислый фуксин, пикриновая кислота, светлый зеленый и другие);

Специальные красители окрашивают только определенные структуры клеток или отдельные химические соединения в клетках и межклеточном веществе (осмиевая кислота, азотнокислое серебро, хлорное золото, суданы III и IV, орсеин, муцикармин и др.)

Способность различных цито- и гистологических структур окрашиваться теми или иными красителями называется тинкториальным свойством (от лат. tinctura - настойка).

6) Заключение окрашенных срезов осуществляется при приготовлении временных микропрепаратов в воду, глицерин, глицерин-желатин, а для приготовления постоянных препаратов - в бальзам, полистирол, специальные смолы (дамар-лак и др.).